UE Biochemie

Aus BioSalzburg

Alte Prüfungsfragen

Welche der nachfolgenden Prozeduren sind nicht geeignet um an DNA gebundene Proteine abzulösen:

1. Ethanolfällung
2. Verdau mit MNase
3. Verdau mit Proteinkinase K
4. Zugabe von chaotrogen Salzen
5. Zugabe von EDTA

A: 1,2,5 B: 2,3,4 C: 1,3,5 D: 3,4 E: 1,3

Folgende Aussagen über Ni - NTA Sepharose (Nickel - Nitrilotriacetic Acid) sind richtig:#

1. Nur Proteine mit einem Anhängsel aus Histidin bleiben an der Säulenmatrix hängen
2. Die Trennkapazität dieses Chromatographieverfahrens ist im Vergleich zur Ionenaustauschchromatographie sehr hoch
3. Selektivität dieses 1-Step Trennverfahren ist im Vergleich zu Siebchromatographie sehr hoch
4. Die Eluation des Proteins erfolgt über einen sinkenden pH - Gradienten
5. Das mit der Säulenmatrix interagierende Protein wird mit Imidazol von der Säule eluiert.

A: 1,3,5 B: 1,2,3,5 C: 2,4 D: 1,2,3 E: 1,2,3,4,5

Der Cut-Off-Wert einer Dialysemembran beträgt 10 kD. Sie können einen Dialyseschlauch mit diesem Ausschlusswert dazu verwenden um:

1. Proteinlösungen zu konzentrieren
2. niedermolekulare Verunreinigungen aus einer Proteinlösung zu entfernen
3. Salzionen aus dem zu dialysierenden Material auszuverdünnen
4. Proteine im Inneren des Schlauches zurückzuhalten
5. die Ionenkonzentration in der Proteinlösung bei Bedarf erhöhen.

A:3,4 B:1,2,3,4,5 C:2,3,4 D: 1,2,5 E:4,5

Sie haben in Ihrem Probenaufbereitungspuffer das Mecaptoethanol vergessen. Die Protein-Proben werden von Ihnen wie gewohnt vor dem Auftragen auf das SDS-PAGE aufgekocht. Das Fehlen des Mercaptoethanols im Probenpuffer führt zu welchem der folgenden Effekte:

1. Die Proteine werden durch das Erhitzen denaturiert; die Disulfidbrücken in den Proteinen jedoch nicht reduziert.
2. Die Laufeigenschaften einiger Proteine ändern sich im Vergleich zu ordnungsgemäß vorbereiteten Protein-Proben.
3. Die Laufweite der Proteine ändert sich durch die fehlerhafte Probenaufbereitung nicht.
4. Die Proteinbanden laufen durch das fehlende Mercaptoethanol langsamer durch das Gel.
5. Das Erwärmen allein führt zum vollständigen Entfalten aller Proteine.

A: 1,3,4 B: 2,5 C:1,2 D:1,2,4 E:3,4

Prüfung 21.1.2009

Achtung: Markierte Antworten nicht unbedingt richtig! UE Biochem 1, 21.1.09